จากอดีตเจ้าหน้าที่รักษาความปลอดภัยกะกลางคืนของพิพิธภัณฑ์ประวัติศาสตร์แห่งชาติ เวลานี้ แลร์รี่ เดลี่ย์ (เบน สติลเลอร์) กลายเป็นนักธุรกิจที่ประสบความสำเร็จอย่างสวยงาม แต่ไม่นานหลังทราบข่าวว่าบรรดาสหายเก่าจากพิพิธภัณฑ์ที่เขาเคยทำงานถูกย้ายมาอยู่ที่สถาบันสมิธโซเนี่ยน แลร์รี่ก็ได้รับโทรศัพท์ทางไกลจากเจดีดิอาห์ (โอเว่น วิลสัน) มาเตือนว่าสี่จอมวายร้ายที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในประวัติศาสตร์โลกได้มีชีวิตขึ้นมา และกำลังก่อแผนยึดสมิธโซเนี่ยน ก่อนที่จะยึดโลกเป็นเป้าหมายต่อไป แลร์รี่จึงต้องกลับมาร่วมมือกับเพื่อนรักทั้งเก่าและใหม่ เพื่อทำลายแผนร้ายของจอมแสบทั้งสี่ให้จงได้